金黃色葡萄球菌顯色培養基的原理及操作步驟介紹
金黃色葡萄球菌顯色培養基是用于金黃色葡萄球菌的分離和初步鑒別。可替代傳統的高鹽甘露醇及血平板培養基,具有較高的特異性、靈敏度,可消除假陰性及假陽性;肉眼觀察菌落顏色即可用于金葡菌的初步鑒定,在此培養基中添加妥布霉素或甲氧西林等抗生素,可篩選耐甲氧西林金葡菌(MRSA);培養基的配置簡單,煮沸即可,無須高壓滅菌;操作簡便,劃線接種,37?C培養,24小時出結果;是臨床檢測、食品工業、化妝品工業的好幫手。
檢驗原理:
蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;顯色劑與金黃色葡萄球菌具有的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在無色透明平板上,金黃色葡萄球菌產生粉紅-紫紅的邊緣整齊菌落;抑菌劑可抑制雜菌的生長。
用法:
稱取金黃色葡萄球菌顯色培養基17.26g加入200ml蒸餾水,加熱*溶解,煮沸2-3min,冷至50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。
操作步驟:
涂布法:
1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液;
2、取1ml適宜稀釋度的樣品液加入表面干燥的金黃色葡萄球菌顯色培養基平板中心,每個稀釋度做2個平板;
3、以L形玻璃棒將樣品液涂布于瓊脂表面,避免涂到平板邊緣,將平板正置直至樣品液被培養基吸收;
4、平板倒置放入培養箱36℃培養18-24h,典型的金黃色葡萄球菌顯色培養基為凸起的藍綠色菌落;
5、計數平板上所有凸起的藍綠色菌落。
劃線法:
1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液;
2、取10ul-20ul樣品液劃線接種于已凝固好的金黃色葡萄球菌顯色培養基平板上;
3、倒置放入培養箱36℃培養18-24h,典型的葡萄球菌顯色培養基為凸起的藍綠色菌落;
注意:金黃色葡萄球菌顯色培養基鏡檢為革蘭氏陽性球菌,且兔血漿凝固酶試驗為陽性。