手把手教你操作B族鏈球菌顯色培養(yǎng)基
B族鏈球菌顯色培養(yǎng)基檢測(cè)GBS需要18-24小時(shí),且無需特殊培養(yǎng)條件和次代培養(yǎng),平板上的菌落可進(jìn)行藥敏和血清分型,也可用于對(duì)標(biāo)本中細(xì)菌含量的半定量評(píng)估,是一種靈敏,快速的GBS檢測(cè)方法。
原理:
B族鏈球菌感染是引起新生兒疾病和死亡的主要原因。B族鏈球菌也可引起孕婦、老年人的嚴(yán)重疾病和成為并發(fā)癥。B族鏈球菌通常位于女性陰道和男女直腸內(nèi)。在新生兒中,B組鏈球菌常引起敗血癥、腦膜炎和肺炎。在成年人,B族鏈球菌偶爾會(huì)引起嚴(yán)重的血液感染、尿路感染、皮膚感染和肺炎,尤其是免疫較弱的人群。母親的生殖道感染與嬰兒感染和新生兒疾病風(fēng)險(xiǎn)存在關(guān)聯(lián)。
樣本采集通常在懷孕35~37周拭子采集陰道和直腸來完成。然后將拭子接種到B族鏈球菌選擇性顯色瓊脂上。傳統(tǒng)方法是通過Todd Hewitt肉湯(含黏菌素和萘啶酸)增菌,再傳代到血平板上完成,以達(dá)到較大回收率。B族鏈球菌顯色培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)水解物提供氮源和碳源化合物、長(zhǎng)鏈氨基酸和其他鏈球菌生長(zhǎng)必需的的營(yíng)養(yǎng)素。緩沖鹽提供培養(yǎng)基的緩沖能力。培養(yǎng)基中的選擇因子抑制伴隨的菌群。培養(yǎng)基中的顯色劑被B族鏈球菌的β-葡萄糖苷酶裂解,使B族鏈球菌菌落顯藍(lán)色。培養(yǎng)基不透明的黃色本底,有利于更好的觀察。
操作:
.基礎(chǔ)干粉+增補(bǔ)劑S1 取瓶?jī)?nèi)B族鏈球菌顯色培養(yǎng)基基礎(chǔ)干粉加入1000ml蒸餾水中(可根據(jù)需要按照44.7g/L的比例擴(kuò)大或縮小),攪拌溶解,然后,按照2g/L的比例加入增補(bǔ)劑S1,攪拌至瓊脂*溶解。常規(guī)高壓滅菌(121℃,15min),然后水浴冷卻至45-50℃,保持?jǐn)嚢琛?/div>
.增補(bǔ)劑S2 取透明的容器,用10ml蒸餾水溶解0.25g增補(bǔ)劑S2,(按照25mg/ml的比例擴(kuò)大或縮小),用磁力攪拌器快速攪拌均勻,使其*溶解。B族鏈球菌顯色培養(yǎng)基過濾除菌后,按照10ml/L的比例加入已備好的基礎(chǔ)干粉+增補(bǔ)劑S1的混勻液體中,輕輕混勻,然后傾入無菌培養(yǎng)皿中,使其凝固。