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    小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基檢驗原理

    點擊次數(shù):651 更新時間:2021-12-28
      提到小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersinia enterocolitica),不可避免要蹭一下它同屬姐妹--鼠疫桿菌,即鼠疫耶爾森氏菌(Yersinia pestis)的熱度,作為引發(fā)令人聞風(fēng)喪膽的鼠疫(黑死病)的致病菌,鼠疫耶爾森氏菌赫赫有名,相比之下,同屬的小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌就有點小透明了。但話又說回來,在歐、美、澳洲國家,小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌還是有一定辨識度的,特別是在溫帶、寒帶國家像比利時、加拿大和澳大利亞,是導(dǎo)致細(xì)菌性感染排位第三的致病菌,超過志賀氏桿菌,僅次于沙門氏菌和彎曲桿菌。
      蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;色素與單增李斯特氏菌具有的酶發(fā)生特異性反應(yīng),水解底物,釋放出顯色基團(tuán),在平板上,單增李斯特氏菌呈現(xiàn)綠~藍(lán)綠色的光滑規(guī)則的小菌落;抑制劑和配套試劑可抑制雜菌的生長。
      小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基使用方法:
      1.稱取顯色培養(yǎng)基干粉47.3g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,充分溶解,121℃高壓滅菌15min,冷至50℃左右。
      2.取10支配套試劑分別加入1mL無菌水,使之*溶解。
      3.將配套試劑加入到已冷至48℃左右基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻后傾注無菌平皿。
      4.按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液,進(jìn)行增菌培養(yǎng)后,用接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種于顯色平板上,置于36±1℃培養(yǎng)24-48小時。
      5.觀察結(jié)果。致病性李斯特24h后開始出現(xiàn)藍(lán)綠色,至36~48h藍(lán)綠色明顯。挑取顯色平板上呈藍(lán)綠色光滑規(guī)則,直徑約1~2mm的可疑單菌落進(jìn)行進(jìn)一步的試驗。
      6.對疑似單增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管進(jìn)行下一步的鑒定。
      注:如產(chǎn)品類型為干粉,按上述1-6進(jìn)行操作;若為即用型平板,按4-6進(jìn)行操作即可。
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